12388.大鼠嗅鞘細(xì)胞與人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞混合培養(yǎng)的研究

1、目錄中文摘要1英文摘要3符號說明5前言6日U舌材料與方法8結(jié)果21討論25結(jié)論32附圖33參考文獻(xiàn)40綜述45致謝56原創(chuàng)性聲明”57泰山醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文白的檢測。選擇第3天、7天、14天3個(gè)時(shí)間點(diǎn)倒置相差顯微鏡下觀察細(xì)胞生長和分化情況：選取每組3個(gè)時(shí)問段部分細(xì)胞行細(xì)胞免疫熒光檢測臍帶問充質(zhì)干細(xì)胞nestin，MBP，NF—H表達(dá)情況，并采集照片，采集5個(gè)非重復(fù)視野下蛋白表達(dá)陽性的細(xì)胞數(shù)與細(xì)胞總數(shù)，計(jì)算蛋白陽性細(xì)胞所占百分比。(4)細(xì)

2、胞混合培養(yǎng)后細(xì)胞nestin，MBP，NF～HmRNA的表達(dá)情況。提取3天，7天，14天3個(gè)時(shí)間點(diǎn)細(xì)胞的RNA，行熒光定量PCR術(shù)，檢測人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞巢蛋白(nestin)、髓磷脂堿性蛋白(ⅧP)與高分子量神經(jīng)絲蛋白(NF—H)各個(gè)時(shí)間點(diǎn)的表達(dá)情況。結(jié)果1大鼠嗅鞘細(xì)胞(OECs)和人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(HUC—MSCs)原代培養(yǎng)及純化后，可獲得純度90％以上的細(xì)胞。2混合培養(yǎng)后細(xì)胞生長狀態(tài)良好，細(xì)胞增殖旺盛，兩種細(xì)胞混合培養(yǎng)未出現(xiàn)排異

3、反應(yīng)。3。MTT法結(jié)果顯示，混合培養(yǎng)組OD值明顯高于單一細(xì)胞組OD值，差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(尺001)。4細(xì)胞免疫熒光染色顯示：實(shí)驗(yàn)組(A組)和陽性對照組(B組)可見陽性染色細(xì)胞，A組陽性染色細(xì)胞百分率較B組染色陽性細(xì)胞百分率要高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P001)：C組未見到nestin，MBP，NFH蛋白陽性染色細(xì)胞。5熒光定量PCR檢測結(jié)果顯示：實(shí)驗(yàn)組(A組)和陽性對照組(B組)nestin，MBP，NF—H3種蛋白的mRNA均出現(xiàn)表達(dá)

4、，且實(shí)驗(yàn)組要比陽性對照組表達(dá)高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P001)；C組3種神經(jīng)標(biāo)志物在mRNA水平?jīng)]有出現(xiàn)表達(dá)。結(jié)論1大鼠嗅鞘細(xì)胞和人臍帶問充質(zhì)干細(xì)胞混合培養(yǎng)后，細(xì)胞生長狀態(tài)良好，細(xì)胞問未見排斥反應(yīng)。2大鼠嗅鞘細(xì)胞和人臍帶問充質(zhì)干細(xì)胞混合培養(yǎng)后，細(xì)胞總數(shù)明顯較單一細(xì)胞組多，細(xì)胞的生長增殖明顯加快：3兩種細(xì)胞混合培養(yǎng)后，OECs能夠誘導(dǎo)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(HUC—MSCs)向神經(jīng)細(xì)胞方向分化，細(xì)胞能夠表達(dá)nestin、MBP、NFH3種神經(jīng)細(xì)