放射后大鼠腮腺細(xì)胞自噬的初步觀察.pdf

1、目的:觀察60Coγ射線對(duì)腮腺細(xì)胞自噬的影響，探討放射后腮腺細(xì)胞自噬與凋亡的關(guān)系。
　　方法:將54只成年雄性SD大鼠隨機(jī)分為9組，6只/組，3組接受0Gy放射（對(duì)照組）;3組接受6Gy放射;3組接受12Gy放射。以60Coγ射線對(duì)大鼠頭頸部進(jìn)行放射，放射方式為一次性給予所需放射劑量，建立腮腺放射損傷模型。分別于放射后12、24和48小時(shí)收集腮腺組織。HE染色后，顯微鏡下觀察放射前后腮腺組織變化。在透射電子顯微鏡下觀察腮腺細(xì)胞的自

2、噬及凋亡情況，統(tǒng)計(jì)自噬陽性細(xì)胞及凋亡細(xì)胞的百分率。免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè)腮腺組織Bcl-2、Bax、Beclin1、LC3蛋白的表達(dá)，用病理圖像分析軟件分析相應(yīng)蛋白的表達(dá)水平。應(yīng)用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。
　　結(jié)果:1.放射后，腮腺細(xì)胞出現(xiàn)損傷反應(yīng)，如細(xì)胞核縮小、變形、空泡性變和壞死。透射電鏡下，對(duì)照組與放射組腮腺細(xì)胞中均可見自噬體與自噬溶酶體。部分放射后發(fā)生凋亡的腮腺細(xì)胞中可見自噬體和自噬溶酶體。
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3、.與相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)的對(duì)照組相比，全部放射組自噬陽性細(xì)胞在所觀察的細(xì)胞中所占比例無明顯增多或減少，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。各放射組腮腺細(xì)胞的凋亡率顯著均高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05）。放射后不同時(shí)間點(diǎn)的12Gy放射組細(xì)胞凋亡率與6Gy放射組相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　3.與相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)的對(duì)照組比較，各放射組腮腺細(xì)胞Bcl-2蛋白表達(dá)水平顯著下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，而各放射組腮腺細(xì)胞

4、Bax蛋白表達(dá)水平明顯上升，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。放射后不同時(shí)間點(diǎn)的12Gy放射組Bcl-2與Bax蛋白表達(dá)與6Gy放射組相比，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　4.與相同時(shí)間點(diǎn)的對(duì)照組比較，所有放射組腮腺細(xì)胞的Beclin1和LC3蛋白表達(dá)水平均無明顯變化，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　結(jié)論:1.60Coγ射線能激活腮腺細(xì)胞凋亡，但其對(duì)腮腺細(xì)胞自噬的影響可能是微弱的。
　　2.放射后腮腺