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文檔簡介
1、目的:觀察四種抗骨質(zhì)疏松治療藥物(維生素K2、PTH、活性維生素D3、阿倫膦酸鹽)對人血管平滑肌細胞及人MG-63細胞基質(zhì)Gla蛋白,探討MGP在骨質(zhì)疏松發(fā)病中的可能作用及骨質(zhì)疏松治療藥物對預防動脈硬化的可能作用。
方法:⑴選取人血管平滑肌細胞及經(jīng)典的具有成骨細胞表型特征的成骨細胞模型人成骨肉瘤MG63細胞進行傳代培養(yǎng)。⑵分別給予不同濃度的維生素K2、PTH、活性維生素D3、阿倫膦酸鹽干預培養(yǎng)24h:維生素K2(10-7、10
2、-6、10-5mol/L),活性維生素D3(10-10、10-9、10-8mol/L),PTH(10-9、10-8、10-7mol/L),阿倫膦酸鹽(10-6、10-5、10-4mol/L),每種藥物均設(shè)立空白對照。⑶培養(yǎng)24h后抽提血管平滑肌細胞及MG-63細胞總蛋白,采用Western-Blot方法檢測血管平滑肌細胞及MG-63細胞中基質(zhì)Gla蛋白表達的變化。
結(jié)果:①維生素K2、活性維生素D3、PTH、阿倫膦酸鹽對人血管
3、平滑肌細胞基質(zhì)Gla蛋白表達的影響:維生素K2、活性維生素D3、PTH、阿倫膦酸鹽均可上調(diào)人血管平滑肌細胞基質(zhì)Gla蛋白的表達,并且隨著藥物濃度呈梯度增高,MGP蛋白的表達亦明顯增高,差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。②維生素K2、PTH、活性維生素D3、阿倫膦酸鹽對人成骨肉瘤MG-63細胞基質(zhì)Gla蛋白表達的影響:維生素K2、活性維生素D3、PTH、阿倫膦酸鹽均可上調(diào)人成骨肉瘤MG-63細胞基質(zhì)Gla蛋白的表達,并且隨著藥物濃度呈梯
4、度增高,MGP蛋白的表達亦明顯增高,差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
結(jié)論:Western-Blot技術(shù)證實骨質(zhì)疏松藥物可影響人血管平滑肌細胞中MGP的表達,同時證實MGP在人成骨肉瘤MG-63細胞中有表達。骨質(zhì)疏松治療藥物維生素K2、PTH、活性維生素D3、阿倫膦酸鹽均可促進血管平滑肌細胞和MG-63細胞基質(zhì)Gla蛋白的表達,且呈劑量依賴性。骨質(zhì)疏松治療藥物可能成為動脈硬化預防和治療的新研究方向,同時MGP可能成為骨質(zhì)疏
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