小鼠肝干細(xì)胞存在的病理學(xué)依據(jù)及其在肝再生中的作用.pdf

1、在個體發(fā)育中,細(xì)胞有分化等級差異——從受精卵、胚胎干細(xì)胞、各級多能干細(xì)胞到有成熟結(jié)構(gòu)和功能的各組織、器官的細(xì)胞.個體發(fā)育完成后是否某些等級的干細(xì)胞仍存留于個體的組織器官中呢?生命歷程中,組織器官不可避免地經(jīng)歷生理性或病理性細(xì)胞丟失和再生.存留于造血系統(tǒng)、表皮和腸上皮中的干細(xì)胞在這種再生中發(fā)揮了關(guān)鍵作用.肝臟中又是什么情況昵?為此,該研究針對上述問題展開工作,主要方法、結(jié)果和結(jié)論概述如下:1.得到C57小鼠不同來源的肝干細(xì)胞候選細(xì)胞:骨髓

2、細(xì)胞(BMC)、胎肝源上皮樣集落形成細(xì)胞(FECFC)和兩種肝內(nèi)源性成體肝上皮樣集落形成細(xì)胞(LEPCs和HECFC).細(xì)胞體外誘導(dǎo)分化、回輸體內(nèi)脾結(jié)節(jié)形成實驗和受體內(nèi)衍生于骨髓供體細(xì)胞的Mx-Cre和sry的檢測(免疫組化和PCR),表明:這幾種來源(骨髓源、胎肝源、成體肝內(nèi)源)的細(xì)胞具備肝干細(xì)胞特性.另發(fā)現(xiàn)肝損傷還能使骨髓源脾結(jié)節(jié)細(xì)胞肝膽標(biāo)志表達(dá)增強(qiáng).2.病理觀察肝再生中肝/膽管細(xì)胞、OVC和肝細(xì)胞源大核分裂相及肝干細(xì)胞源小核分裂相

3、,發(fā)現(xiàn):1)RS/PH組:小核分裂相所反映的內(nèi)外源肝干細(xì)胞(包括OVC)可能是肝重建的決定因素,其中竇板交界處小核分裂相可能是骨髓源肝干細(xì)胞參與肝重建的形態(tài)學(xué)證據(jù);2)RS組14天后小核分裂相逐步增多,可能反映了內(nèi)外源肝干細(xì)胞在肝細(xì)胞更新中的作用;3)大小核分裂相所反映的肝細(xì)胞與肝干細(xì)胞可能不僅是單純PH組肝重建的共同決定因素,而且可能共同參與了正常對照組和假手術(shù)組肝細(xì)胞的更新.結(jié)合上述結(jié)果和相關(guān)報道,提出了肝流域假說——肝內(nèi)源性成體肝

4、干細(xì)胞存在于小膽管/COH附近,其能復(fù)制、產(chǎn)生子代(由OVC經(jīng)小肝細(xì)胞)向肝細(xì)胞分化;不同分化等級的細(xì)胞從小膽管/COH附近流經(jīng)肝板匯向中央靜脈,形成該流域干流;由血循環(huán)路過的外源性干細(xì)胞在干流不同的部位分裂增殖、部分轉(zhuǎn)分化為肝系細(xì)胞,作為支流匯入干流.生理性肝細(xì)胞更新和病理性肝重建實際上是肝流域中三種成分(位于小膽管/COH附近的肝干細(xì)胞/OVC,有有限增殖潛能的成熟肝細(xì)胞和外源性干細(xì)胞)共同對肝再生信號作出反應(yīng)的結(jié)果.3.肝內(nèi)源性成