2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、為研究不同品種豬骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞遷移和粘附差異的分子機(jī)制,本試驗(yàn)以華南地方品種藍(lán)塘豬和外來品種長白豬背最長肌的骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞為試驗(yàn)材料,利用細(xì)胞劃痕試驗(yàn)和transwell小室遷移試驗(yàn),比較兩品種豬骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞的遷移能力;細(xì)胞外基質(zhì)(Fn)-細(xì)胞粘附試驗(yàn),比較兩品種豬骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞的粘附能力;運(yùn)用細(xì)胞免疫熒光技術(shù),檢測兩品種豬骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞粘著斑和F-肌動蛋白的表達(dá);采用Western blot技術(shù),檢測兩種衛(wèi)星細(xì)胞遷移24 h和粘附2

2、 h時(shí)間點(diǎn)FAK/paxillin信號通路的蛋白表達(dá)情況,結(jié)合實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)檢測兩種衛(wèi)星細(xì)胞粘附2 h時(shí)整合素(ITGB)關(guān)鍵基因的表達(dá);同時(shí)以藍(lán)塘豬骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞為材料,選用 p-FAK特異性抑制劑PF-573228,分別以0、5和10μmol/L濃度處理藍(lán)塘豬骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞24 h,檢測其對衛(wèi)星細(xì)胞遷移和粘附的影響,以及粘著斑、F-肌動蛋白和FAK信號通路相關(guān)蛋白的表達(dá)變化。
  試驗(yàn)結(jié)果如下:
 ?。?)細(xì)胞劃

3、痕試驗(yàn)和transwell小室遷移試驗(yàn)表明,藍(lán)塘豬骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞的遷移能力顯著強(qiáng)于長白豬骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞;細(xì)胞外基質(zhì)-細(xì)胞粘附試驗(yàn)表明,藍(lán)塘豬骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞的粘附能力顯著強(qiáng)于長白豬骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞。
 ?。?)細(xì)胞免疫熒光結(jié)果表明,相比于長白豬骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞,藍(lán)塘豬骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞的粘著斑表達(dá)更豐富,而F-肌動蛋白的表達(dá)量更低。
 ?。?)藍(lán)塘豬骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞在遷移24 h的p-FAK(Tyr397)和p-paxillin(Tyr

4、118)蛋白表達(dá)顯著高于長白豬骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞;藍(lán)塘豬骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞在粘附2 h的p-FAK(Tyr397),p-paxillin(Tyr118)和p-Akt(Ser473)蛋白表達(dá)顯著高于長白豬骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞,粘附基因ITGB3存在差異的趨勢。
 ?。?)以10μmol/LPF573228濃度處理藍(lán)塘豬骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞24 h,能顯著抑制p-FAK(Tyr397)的蛋白表達(dá);且5和10μmol/L PF-573228處理能顯著抑制骨

5、骼肌衛(wèi)星細(xì)胞的遷移能力,骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞在10μmol/L PF-573228處理濃度下,細(xì)胞粘附能力受到抑制。
 ?。?)與對照組相比,PF-573228以5和10μmol/L濃度處理衛(wèi)星細(xì)胞能降低粘著斑的數(shù)量,抑制p-paxillin(Tyr118)和p-Akt(Ser473)的蛋白表達(dá),不影響F-肌動蛋白的變化。
  以上結(jié)果說明:藍(lán)塘豬和長白豬骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞遷移和粘附的差異與粘著斑和 F-肌動蛋白的形成密切相關(guān),F(xiàn)AK

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