Bmi-1沉默對神經(jīng)干細胞增殖的影響及其作用機制.pdf

1、目的：Bmi-1是一種屬于PcG家族的原癌基因，它直接參與細胞生長、增殖的調(diào)節(jié)，是干細胞自我更新所必需的。利用Bmi-1與綠色熒光蛋白(GFP)共表達的慢病毒載體轉(zhuǎn)染神經(jīng)干細胞，觀察Bmi-1在神經(jīng)干細胞中的表達量變化及對可能的下游基因表達的影響，探討其與神經(jīng)干細胞增殖的關(guān)系。 方法：實驗組分為三組，空白對照組、空載體對照組及實驗組（轉(zhuǎn)染7天），利用Bmi-1基因和綠色熒光蛋白(GFP)共表達的慢病毒載體轉(zhuǎn)染人胚胎紋狀體神經(jīng)干細

2、胞，觀察轉(zhuǎn)染前后細胞的增殖能力及細胞衰老的變化，同時應(yīng)用實時定量PCR檢測轉(zhuǎn)染前后神經(jīng)干細胞中Bmi-1及P161NK4a等下游基因表達的變化。 結(jié)果：①空白對照組的克隆形成率是7.6％±0.2％，bmi-1-shRNA實驗組的是1.4％±0.3％(p<0.05)；空白對照組Brdu插入率是44.4％±9.3％，bmi-1-shRNA實驗組的是14.1％±6.7％(p<0.05)；②轉(zhuǎn)染Bmi-1慢病毒載體的神經(jīng)干細胞衰老加快；