結(jié)腸癌細(xì)胞抗原修飾樹(shù)突狀細(xì)胞活化T淋巴細(xì)胞的殺瘤效應(yīng).pdf

1、目的：以人外周血單個(gè)核細(xì)胞為前體細(xì)胞，誘導(dǎo)出樹(shù)突狀細(xì)胞，經(jīng)結(jié)腸癌細(xì)胞抗原修飾，并經(jīng)活化T淋巴細(xì)胞，觀察T淋巴細(xì)胞對(duì)結(jié)腸癌細(xì)胞的殺傷效應(yīng)。 方法：取確診為結(jié)腸腺癌的病人手術(shù)標(biāo)本，體外分離和培養(yǎng)出結(jié)腸癌細(xì)胞，并用流式細(xì)胞儀和免疫組化鑒定：分離該病人外周血單個(gè)核細(xì)胞，聯(lián)合應(yīng)用粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子、白細(xì)胞介素-4體外誘導(dǎo)為樹(shù)突狀細(xì)胞；培養(yǎng)樹(shù)突狀細(xì)胞第5天用同一病人結(jié)腸癌細(xì)胞凍融抗原以不同時(shí)間(24h，36h，48h)修飾樹(shù)突狀細(xì)

2、胞，并經(jīng)流式細(xì)胞儀進(jìn)行表型鑒定；樹(shù)突狀細(xì)胞與T淋巴細(xì)胞共孵(共孵時(shí)間12h、24h、36h、48h)以活化T淋巴細(xì)胞，體外觀察T淋巴細(xì)胞對(duì)結(jié)腸癌細(xì)胞的殺傷作用。 結(jié)果：培養(yǎng)出結(jié)腸癌細(xì)胞。通過(guò)外周血單個(gè)核細(xì)胞成功誘導(dǎo)出表達(dá)CD11c，CD80，HLA-DR分子的樹(shù)突狀細(xì)胞，經(jīng)腫瘤抗原修飾后，其表達(dá)上調(diào)。培養(yǎng)第5天通過(guò)結(jié)腸癌細(xì)胞凍融抗原以不同時(shí)間(24h，36h，48h)修飾樹(shù)突狀細(xì)胞，以及不同時(shí)間(12h，24h，36h，48h)

3、與T淋巴細(xì)胞共孵后對(duì)結(jié)腸癌細(xì)胞殺傷率的不同，說(shuō)明誘導(dǎo)出的樹(shù)突狀細(xì)胞在體外有刺激T淋巴細(xì)胞增殖的活性，其活性在加凍融抗原修飾36h以及與T淋巴細(xì)胞共孵36h時(shí)最高。 結(jié)論： 1．分離人外周血單個(gè)核細(xì)胞，聯(lián)合應(yīng)用粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子、自細(xì)胞介素-4，第5天加腫瘤抗原修飾樹(shù)突狀細(xì)胞36h后在體外能夠誘導(dǎo)出成熟的高表達(dá)CD11c，CD80，HLA-DR分子的樹(shù)突狀細(xì)胞。 2．腫瘤抗原修飾的樹(shù)突狀細(xì)胞在體外有刺激T