CRISPR-Cas9技術(shù)敲除faf1基因?qū)Π唏R魚軟骨及肌節(jié)發(fā)育的影響_3266.pdf_第1頁
已閱讀1頁，還剩74頁未讀， 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內(nèi)容提供方，若內(nèi)容存在侵權(quán)，請進(jìn)行舉報或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡介

1、目的：
　　利用CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)敲除斑馬魚faf1基因，并研究faf1基因?qū)Π唏R魚發(fā)育的影響。
　　方法：
　　針對斑馬魚faf1基因設(shè)計并制備gRNA，通過顯微注射技術(shù)將gRNA與Cas9 mRNA混合注入斑馬魚單細(xì)胞胚胎中，酶切和基因測序技術(shù)篩選出發(fā)生突變的F0代斑馬魚，將其與野生型斑馬魚外交得到F1代雜合體，再將同種突變類型的F1代斑馬魚自交得到F2代純合子斑馬魚，并用顯微鏡觀察、記錄每一代斑馬

2、魚表型。
　　結(jié)果：
　　成功制備了faf1 gRNA和Cas9 mRNA。位于faf16號外顯子的gRNA6和4號外顯子的gRNA7能使faf1基因發(fā)生移碼突變。篩選出可遺傳突變類型（mutant type1,MU1）并觀察到該雜合突變型斑馬魚有體細(xì)胞色素沉積延遲、4dpf(days post fertilization,dpf)開使尾部肌節(jié)出現(xiàn)“結(jié)節(jié)樣”表型以及頭顱縮小、舌骨小角角度增大等顱面軟骨畸形的變化，并于受精后8

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽，若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間，僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理，對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯，并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容，請與我們聯(lián)系，我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論